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如何提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性
發(fā)布時(shí)間： 2023-06-30 點(diǎn)擊次數(shù)： 1856次1.首先確定模板 RNA 完整性好，無(wú) DNA 污染。
2.RNA 模板中不應(yīng)含有擴(kuò)增反應(yīng)抑制劑。
3.為了防止模板降解，在反應(yīng)體系中加入 RNase 抑制劑 RNasin。
4.使用適量的模板 RNA，模板量太多會(huì)降低特異性，太少會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增不出條帶或條帶太弱。
5.若模板中有二級(jí)結(jié)構(gòu)，可通過(guò)提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來(lái)提高擴(kuò)增效果。
6.設(shè)計(jì)引物時(shí)，避免在引物 3’端含有互補(bǔ)序列，避免形成內(nèi)部發(fā)卡結(jié)構(gòu)。深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東，服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開(kāi)發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。
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