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小鼠皮脂腺的油紅染色實驗步驟

發(fā)布時間： 2021-12-12　　點擊次數(shù)： 3259次

材料與儀器

器材：棕色可密封瓶、研缽、漏斗、定性濾紙、冷凍切片等
試劑：
① 油紅染料（稱取預(yù)先研磨粉碎的 0.5 g 油紅干粉，溶于少量異丙醇中，然后加異丙醇至 100 ml，棕色瓶密封（或錫箔紙包裹避光）4 ℃ 保存，為儲存液，可長期保存。用時油紅工作液需現(xiàn)配：取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混勻，定性濾紙過濾，稀釋后數(shù)小時內(nèi)用完）

② 異丙醇

步驟

小鼠皮脂腺的油紅染色實驗的基本過程可分為如下幾步：

1. 將冷凍切片從冰箱中取出，晾干。

2. 用 PBS 洗 3 次，每次 5 分鐘。

3. 用 4％多聚甲醛固定 5～10 分鐘。

4. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

5. 將切片放入 60％異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

6. 將切片放入油紅工作液染色 15 分鐘。

7. 用 60％異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

8. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

9. 蘇木素復(fù)染 2 分鐘。

10. 水充分漂洗 10 分鐘，把周圍水分抹干。

11. 封片劑封片，鏡檢。結(jié)果示例如圖 8-11-2 所示。

注意事項

1. 由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑，所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理，而通過冷凍切片染色來顯示。
2. 做脂肪染色的冷凍切片不能太薄，過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。
3. 蘇木素復(fù)染時間不能過長。
4. 染色結(jié)果不能長期保存，應(yīng)盡快觀察及照相。

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