一、產(chǎn)品說(shuō)明

產(chǎn)品名稱(chēng)：MxSafe Plus核酸染料

品牌：ZETA LIFE

貨號(hào)：MX017-500

規(guī)格： 500ul

儲(chǔ)存條件: 4℃保存，有效期三年。

二、MxSafe Plus核酸染料特點(diǎn)

● 無(wú)毒性：MxSafe/MxSafe Plus*的油性和大分子量特點(diǎn)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果也表明，該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于 EB。

● 靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對(duì)核酸遷移的影響小于 SYBR Green I。

● 穩(wěn)定性高： 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定，耐光性強(qiáng)。

● 信噪比高：樣品熒光信號(hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低。

● 操作簡(jiǎn)單：與 EB 一樣，在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中染料不降解；而電泳后染色過(guò)程也只需 30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗 ， 即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

● 適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳； 可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

● 與 EB 有相同的光譜特性，無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置：標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與觀察 EB 相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在 300nm 紫外光附近可得到最佳激發(fā)。但是 MxSafe不能被 488 nm 氬離 子激光器或相似波長(zhǎng)的可見(jiàn)光*激發(fā)，因此不推薦使用此類(lèi)激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對(duì)于此類(lèi)裝置，我們推薦您使用 MxSafe Plus，它和 SYBR Green I 的光譜相似，靈敏度相當(dāng)，但更加穩(wěn)定。

三、使用方法

1．膠染法（用法同EB）

制膠時(shí)加入 MxSafe/MxSafe Plus 核酸染料（例如：每 50mL 瓊脂糖溶液中加入 5μL MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 儲(chǔ)液 (以此比例類(lèi)推）。 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

鑒于 MxSafe/MxSafe Plus 的高靈敏性，建議減少 DNA 的上樣量，推薦每條泳道 DNA 上樣量是傳統(tǒng)上樣量的 1/2， 例如:傳統(tǒng)上樣量是 5ul/泳道,使用本成品用量就是 2.5ul/泳道,但是不能減少核酸染料的用量（例如：每 50mL 瓊脂糖溶 液中繼續(xù)加入 5μL MxSafe/MxSafe Plus）。

注意事項(xiàng)：

●此方法染色染料用量相對(duì)較少。500 μL 染料大約可以做 100 塊 50mL 的膠。

●由于 MxSafe/MxSafe Plus 具有良好的熱穩(wěn)定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖 晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將 MxSafe/MxSafe Plus 儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然 后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。MxSafe/MxSafe Plus 兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

●如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在， 則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長(zhǎng)的凝膠；延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰；改進(jìn)上樣技巧或 選擇泡染法染色。

●此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

2．泡染法

（1） 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

（2） 用 H2O 將 MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 儲(chǔ)液稀釋約 3,300 倍到 0.1M NaCl 中，制成 3× 染色液。（例如 將 15μL MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 儲(chǔ)液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中）。

（3）將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的 3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色 30min 左右，最佳染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含 3.5～10％丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常 介于 30min 到 1h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。

注意事項(xiàng)：

●用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用 3 次左右。

●3× MxSafe/MxSafe Plus 染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

四、核酸染料比較

特別提醒：

●如果您使用的是紫外成像儀，請(qǐng)選擇 MxSafe；如果您使用激光成像儀、藍(lán)光透射儀或希望在可見(jiàn)光下觀測(cè)，請(qǐng)選 擇 MxSafe Plus。

●MxSafe Plus 染色后推薦使用 Zeta life 公司 DNA 凝膠成像可見(jiàn)光藍(lán)光透射儀（貨號(hào)：CMA001）和核酸擴(kuò)增快速 檢測(cè)儀（貨號(hào)：CMA002）配合使用效果更加。

●在極少數(shù)情況下，質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的 DNA 樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低，此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決 定哪種方法更加合適。

僅供科學(xué)研究使用，禁止用于它用。