大家好！這篇文章是關(guān)于原代培養(yǎng)的入門知識，向剛?cè)腴T的同學(xué)科普這個實驗的基礎(chǔ)。

包括以下內(nèi)容：

1. 原代培養(yǎng)的概念和流程

2. 分離組織的操作和注意事項

3. 解離組織獲取細(xì)胞的三種常見方法

原代培養(yǎng)是指細(xì)胞分離之后至第一次傳代之前的細(xì)胞培養(yǎng)階段，之后細(xì)胞就轉(zhuǎn)變成細(xì)胞系。

原代培養(yǎng)可分為4個步驟：

1. 獲取樣品
   

2. 分離組織

3. 解剖或解離組織

4. 接種于培養(yǎng)皿中培養(yǎng)

用于原代培養(yǎng)的樣品中可來源于2類，一是實驗室樣本，包括實驗動物的器官、組織，例如胚胎、腸道等；二是臨床樣本，例如通過手術(shù)過程分離出來的病人組織。

分離組織

1. 在取材時可以盡量多去除脂肪和壞死的組織。
2. 使用鋒利的手術(shù)刀將組織切碎，以減小對組織的損傷

獲取細(xì)胞

獲取組織之后，我們要把細(xì)胞從組織中分離出來繼續(xù)生長，這個操作可分為兩種:

1.將組織塊貼附于適宜的基質(zhì)中，細(xì)胞可從組織塊向外遷移生長，這個操作過程叫原代外植;

2.將組織塊用機械法或酶消化法處理獲得細(xì)胞懸液，接種細(xì)胞懸液，其中部分細(xì)胞最終將黏附于基質(zhì)開始生長。

如果所取組織很小，則適于用原代外植法；如果組織較大，可用酶消化法以獲得更多的細(xì)胞。

軟的組織適合于用機械法解離，一些硬的組織，如果產(chǎn)物的多少并不重要，或者從纖維間質(zhì)組

織分離松散黏附的細(xì)胞，也可用機械法分離。

胰蛋白酶處理

酶處理方法主要分為胰蛋白酶和膠原酶處理，而胰蛋白酶的反應(yīng)條件來劃分又可以分為冷胰蛋白酶和溫胰蛋白酶兩種。

• 切碎或“溢出"，切割作用或被切表面的破損使細(xì)胞釋放出來
• 篩網(wǎng)擠壓，用注射器芯將組織擠壓過篩網(wǎng)
• 注射器吸打，將組織吸入注射器中，通過-個大孔徑的針頭或?qū)Ч軐⒁后w快速打出
• 用吸管打碎，用大孔徑的吸管吸取組織塊上下吹打

2 不同種類的細(xì)胞應(yīng)采用相應(yīng)的解離方法，例如，胰蛋白酶比膠原酶作用強，建立單細(xì)胞懸液更高效；膠原酶不能解離上皮細(xì)胞，但這一特性成為它的一個優(yōu)點，可利用它使上皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞分離并保持上皮細(xì)胞團(tuán)的活力。機械法比酶消化法快，但對細(xì)胞損傷大。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物致力成為推動生命科學(xué)進(jìn)步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東，服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。

可以在第一時間為用戶提供比較先進(jìn)的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。 專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術(shù)支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進(jìn)的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時為客戶提供服務(wù)。