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斑點(diǎn)濾膜結(jié)合法

發(fā)布時(shí)間： 2022-03-14　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1529次

原理

材料與儀器

待測蛋白質(zhì)樣品
10％三氯醋酸（TCA）考馬斯亮藍(lán)凝膠染色液考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液
Whatman 3 MM 濾紙

步驟

1. 用鉛筆在 3 mm 濾紙上畫出 1 cm x 1 cm 大小的方格；

2. 在每一方格中心加入 3 ul 樣品；

3. 將濾紙涼干，大約需要 15 min；

4. 將濾紙浸入 10％ TCA 溶液中 30 s（TCA 溶液可重復(fù)使用）；

5. 用水快速漂洗濾紙；

6. 將濾紙浸入考馬斯亮藍(lán)凝膠染液中 30 s（染液可重復(fù)使用）；

7. 用水快速漂洗濾紙；

8. 在考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液中使濾紙脫色，脫色在幾分鐘之內(nèi)完成；

9. 通過相應(yīng)顯藍(lán)色的方格，可判斷其含有一定量的蛋白質(zhì)存在。

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