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電解質(zhì)梯度測序膠簡介

發(fā)布時(shí)間： 2021-12-15　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1662次

原理
通過簡單地提高下槽緩沖液的鹽濃度，使凝膠底部的離子強(qiáng)度得以提高，在電泳過程中，鹽離子可以電泳進(jìn)入凝膠并產(chǎn)生重復(fù)性好的及有效的梯度。
材料與儀器
DNA
TBE 乙酸鈉
電泳儀
步驟

1. 按基本方案步驟1~22灌制凝膠及進(jìn)行預(yù)電泳，但上槽緩沖液為0.5×TBE，下槽為1×TBE。

2. 按基本方案步驟23~26步準(zhǔn)備樣品及加樣。

3. 如需測≤400堿基的序列信息，加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽緩沖液至終濃度1 mol/l，執(zhí)行步驟5。

4. 如果需測大于400堿基的序列信息，先按步驟5進(jìn)行，電泳2~3 h，然后加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽至終濃度為1 mol/l。

5. 在60 W 恒功率下電泳。

6. 進(jìn)行基本方案步驟23~33。

同實(shí)驗(yàn)其他方法
變性凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
1. 制作每塊凝膠時(shí)，首先要用肥皂及水小心嚴(yán)格地清洗兩塊30 cm×40 cm的前后玻璃平板，用去離子水沖洗后晾干，用噴射洗瓶噴10%乙酵或異丙醇使平板濕海。 2. 然后用Kimwi
含甲酰胺的測序膠
1. 按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。 2. 按所需濃度配制甲酰胺凝膠溶液，加熱輕輕挽拌使之溶解，冷卻至30℃以下。 3. 加入0.15 ml TEMED
緩沖液梯度測序膠
1. 按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。 2. 在2個(gè)100 ml 燒杯中，配制緩沖液梯度凝膠溶液：50 ml 用0.5×TBE配制，25 ml 用2.5×TBE配制
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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。

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