-
如何提高磷酸鈣轉(zhuǎn)染的效率？
發(fā)布時間： 2021-10-11 點擊次數(shù)： 2127次提高磷酸鈣轉(zhuǎn)染法效率的共通步驟，目的都是為了避免產(chǎn)生會被細(xì)胞內(nèi)吞、加工失效的大顆粒沉淀。
提高轉(zhuǎn)染效率的操作有以下這些：
1、將小分子DNA整合在高分子質(zhì)量基因組DNA上，以大分子作為運載體，能提高轉(zhuǎn)染效率。
2、測試緩沖液適合的ph，可制備幾批pH范圍為6.90～7.15的HEPES鹽緩沖液，分別測試緩沖效率，找到最適pH值。
3、使用轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑，如甘油、氯喹、其他可購買的轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑。因為這些試劑對細(xì)胞有一定毒性，因此，應(yīng)針對每種細(xì)胞系通過實驗確定轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑處理的最佳時機(jī)、時長和強(qiáng)度。
除了這些共通的步驟，不同廠家還會對混勻DNA和磷酸鈣的速度有要求。有些方法要求只能輕輕攪動，有些建議用移液器溫和吹吸混勻，有些則提倡應(yīng)緩慢混合。
因此，在使用磷酸鈣轉(zhuǎn)染時，應(yīng)針對不同試劑和細(xì)胞系，耐心調(diào)整實驗參數(shù)，才是獲得高轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵。
產(chǎn)品中心
Products
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實驗耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實驗耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫
-
蛋白研究系列
-
修飾檢測試劑盒
